抗體測序，其實就是對抗體蛋白進行從頭到尾的一次序列測試工作，它廣泛應用于基因組序列、外顯子序列、DNA甲基化序列以及RNA轉錄組序列。在我們進行單克隆抗體生產的時候，就常常會使用抗體測序技術，可以說，雜交瘤技術是目前抗體測序技術會用最廣泛且最成熟的一個平臺。

　　什么是抗體測序技術?

　　其實抗體測序技術的原理和我們上面說的一樣，就是通過對抗體蛋白進行從頭到尾的測序。通過多酶解技術，通過高分辨率質譜和獨特的數據分析的方式來進行相關序列的檢測。其原理為通過測量串聯質譜中兩個片段離子之間的質量差來確定蛋白氨基酸殘基的質量，然后沿著蛋白的主鏈來確定每個氨基酸，最終得到氨基酸的完整序列的方式。

　　抗體測序的主要流程是什么?

　　1、全序列覆蓋

　　在通過如上方法進行抗體測序的時候，需要確保每個點位的氨基酸有超過10中不同的肽段支持，在對氨基酸進行質量控制，確保每個質譜里都有強離子片段峰證據。這樣，才能保證其全序列覆蓋;

　　2、抗體質量核對

　　對輕重鏈進行質量測定，確保其在范圍內，以確保組裝的抗體序列;

　　3、亮氨酸和異亮氨基酸確定

　　亮氨酸和異亮氨酸的殘基通常是無法區分的，但是卻又容易造成其親和力出現偏差的情況。所以，我們在進行相關測試的時候，可以使用一種集成的策略，通過同源性數據統計的方式，明確區分亮氨酸和異亮氨酸;

　　其實抗體測序的原理并不復雜，但是，很多用戶在自行進行相關測序的時候，往往會出現這樣或那樣的問題，最終造成結果偏差的情況。總的來說，主要是一些細節方面的問題，只要將這些方面的做好，測序則完全不是問題。普健生物專業為廣大用戶提供抗體制備、蛋白表達以及抗體測序服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。