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盤點SPR抗體親和力成熟的幾種常用策略

發表時間:2023-01-17 訪問次數:1718

  抗體親和力成熟的概念在我們進行相關抗體制備的過程中常常會用到,這個技術能在一定程度上解決抗體質量方面的問題,也能提升表達的效率。而想要實現抗體親和力成熟,必須對天然抗體有充分的了解,同時知道其體內成熟的原理,然后通過模擬天外可能出現和存在的一些變化,從而通過相關條件來促進抗體的體外成熟。

  對于天然抗體來說,親和力成熟一般分為體細胞高頻突變和克隆選擇兩個過程,想要抗體出現親和力成熟,抗原的刺激起著至關重要的作用。所以,我們在進行體外抗體親和力成熟時,也常常會利用到相關策略。下面,普健生物就和大家具體聊聊有關抗體體外親和力成熟的幾個策略。

  策略一:隨機突變

  1、錯配PCR。通過改變PCR的反應條件,從而提升核酸發生錯配的幾率,最終將隨機突變引入到基因序列中;

  2、DNA改組。通過對抗體基因進行脫氧核酸酶I切片,隨后在進行PCR擴增,從而完成抗體基因的突變;

  3、鏈改組。也叫鏈天技術,其中一條輕重鏈不變,但是對另外一條輕重鏈進行重組和配對,從而提升抗體親和力(通常會將噬菌體展示技術與此技術結合使用);

  策略二:定向引入

  也叫CDR重組。在抗體親和力成熟的過程中,細胞內的高頻突變區并非均勻分布,而是主要集中在直接接觸的部位。因此,這樣既能獲得足夠多的突變多樣性,又不會破壞蛋白質的結構。所以,我們可以通過在CDR區引入多個抗體,再通過抗體庫進行CDR區的多次重組,這樣就能達到親和力成熟的目的;

  所謂的抗體親和力成熟的過程,其實就是一個體外分子進化、多樣化和擴增的過程,這個過程能夠得到高親和力的抗體,使得低劑量藥劑要過增強的作用。抗體親和力成熟,能增加治療效果,減少各種毒副作用,在抗體藥物研發過程中有著至關重要的作用。普健生物專業為廣大用戶提供SPR抗體檢測服務,如果您有相關需求,歡迎來電咨詢。

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